古朵快訊：ELISA實驗中動物體液采集方法

  ELISA實驗是一種敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。那么ELISA實驗中動物體液該如何采集呢，接下來就給大家具體來介紹一動物體液的采集方法。

  一、血液的采集

  常用的采血方法有割(剪)尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈(動脈)采血、股動脈(靜脈)采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈才學(xué)、后肢小靜脈采血等。

  二、尿液的采集

  實驗動物的尿液常用代謝籠采集，也可通過其他裝置來采集。

  (一)用代謝籠采集尿液

  代謝籠用于收集實驗動物自然排出的尿液，是一種特別設(shè)計的為采集實驗動物各種排泄物的密封式飼養(yǎng)籠，有的代謝籠除可收集尿液外，又可收集糞便和動物呼出的CO2。一般簡單的代謝籠主要用來收集尿液。防在代謝籠內(nèi)飼養(yǎng)的實驗動物，可通過其特殊裝置收集尿液。

  (二)導(dǎo)尿法收集尿液

  施行導(dǎo)尿術(shù)，較適宜于犬、猴等大動物。一般不需要麻醉，導(dǎo)尿時將實驗動物仰臥固定，用甘油潤滑導(dǎo)尿管。對雄性動物，操作員用一只手握住陰莖，另一只手將陰莖包皮向下，暴露龜頭，使尿道口張開，將導(dǎo)尿管緩慢插入，ELISA試劑盒導(dǎo)尿管推進到尿道膜部時有抵抗感，此時注意動作輕柔，繼續(xù)向膀胱推進導(dǎo)尿管，即有尿液流出。雌性動物尿道外口在陰道前庭，導(dǎo)尿時于陰道前庭腹側(cè)將導(dǎo)尿管插入陰道外口，其后操作同雄性動物導(dǎo)尿術(shù)。用導(dǎo)尿法導(dǎo)尿可采集到?jīng)]有污染的尿液。如果嚴格執(zhí)行無菌操作，可收集到無菌尿液。

  (三)輸尿管插管采集尿液

  一般用于要求計量單位時間內(nèi)實驗動物排尿量的實驗。剖腹后，將膀胱牽拉至腹腔外，暴露膀胱底兩側(cè)的輸尿管。在兩側(cè)輸尿管近膀胱處用線分別結(jié)扎，于輸尿管結(jié)扎處上方剪一小口，向腎臟方向分別插入充滿生理鹽水的插管，用線結(jié)扎固定插管，即可見尿液從插管滴出，可以收集。采尿過程中要用38℃熱生理鹽水紗布遮 蓋切口及膀胱。

  三、骨髓的采集

  (一)大鼠、小鼠骨髓的采集

  用頸椎脫臼法處死動物，剝離出胸骨或股骨，用注射器吸取少量的Hank平衡鹽溶液，沖洗出胸骨或股骨中全部骨髓液。如果是取少量的骨髓作檢查，可將胸骨或股骨剪斷，將其斷面的骨髓擠在有稀釋液的玻片上，混勻后涂片涼干即可染色檢查。

  (二)大動物骨髓的采集

  狗等大動物骨髓的采集可采取活體穿刺方法。先將動物麻醉、固定、局部除毛、消毒皮膚，然后估計好皮膚到骨髓的距離，把骨髓穿刺針的長度固定好。ELISA實驗操作人員用左手把穿刺點周圍的皮膚繃緊，右手將穿刺針在穿刺點垂直刺入，穿入固定后，輕輕左右旋轉(zhuǎn)將穿刺針鉆入，當穿刺針進入骨髓腔時常有落空感。狗骨髓的采集，一般采用髂骨穿刺。狗等大動物常用的骨髓穿刺點：胸骨：穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處。肋骨：穿刺部位是第5～7肋骨各點的中點。脛骨：穿刺部位是股骨內(nèi)側(cè)、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨，穿刺結(jié)束后要用膠布封貼穿刺孔，防止發(fā)生氣胸。

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